Лейкопол – набор для диагностики лейкоза КРС

3. Фармацевтическая форма

Антиген вируса лейкоза (АНТИГЕН ВЛ (АГ) –жидкость темно-розового цвета, иногда с розово-оранжевым оттенком разной степени интенсивности.

Специфическая преципитирующая сыворотка (СПС) – прозрачная жидкость соломенно-желтого цвета, которая образует пену при встряхивании.

Солевая смесь с агаром (ССА) – сыпучий порошок белого цвета, содержащий два типа частичек: гранулы агара и кристаллы хлористого натрия, которые составляют основную массу препарата.

4. Иммунобиологические свойства

Одноименные специфические антиген и антитело, расположенные на определенном расстоянии друг от друга в агаровом геле, диффундируют и образуют при встрече друг с другом преципитат в виде белых линий. Каждая из этих линий соответствует только одному комплексу антиген-антитело. В случае несоответствия антигена и антитела линии преципитации не образуются.

5. Клинические особенности

5.1. вид животных:

Крупный рогатый скот

5.2. Показания к применению:

Солевую смесь с агаром переносят в колбу емкостью 300 – 500 см3, добавляют 117,5 – 120 см3 дистиллированной воды и перемешивают 15 - 30 секунд. Колбу с суспензией помещают в кипящую водяную баню и выдерживают 50 - 60 мин, периодически перемешивают до полного растворения.

Растопленный агар - гель разливают по 12,5 - 13 мл в чашки Петри, которые размещают на столе, имеющем четкую горизонтальную поверхность. Формирование слоя геля агара, пригодного для прорезывания лунок, происходит за 10 - 15 минут. Чашки Петри на период застывания геля оставляют с полузакрытыми крышками.

С помощью прямоугольного или шестиугольного штампов прорезают лунки в геле, не допуская отслоение его от поверхности стекла, образованные диски удаляют из лунок. Диаметр каждой лунки - 5,6 мм, расстояние между центральной и периферической лунками - 3 мм (рис.1).

Жидкий антиген для реакции иммунодиффузии используют без предварительной подготовки. Для ускорения растворения его перемешивают стеклянной палочкой.

Специфическую преципитирующих сыворотку (СПС) используют без предварительной подготовки.

При использовании шестиугольного и прямоугольного штампов «Харьковского» образца постановка РОД выглядит так, антиген и специфическую преципитирующею сыворотку вносят в центральные лунки. А испытуемые сыворотки - в лунки периферических рядов (рис. 2, 3).                                                             

После постановки реакции чашки Петри во влажной камере (стерилизатор, эксикатор) помещают в термостат при температуре 22 - 260С.

Учет реакции проводят через 48 - 72 часа. Чашки Петри просматривают в лучах осветителя ОИ – 19, ОИ - 24 и др. Оценку реакции проводят по сравнению с контрольными линиями между антигеном и специфической преципитирующей сывороткой.

Реакцию с испытуемыми сыворотками оценивают как положительную:

• положительная реакция с испытуемой сывороткой инфицированного вирусом лейкоза животного характеризуется образованием линии преципитации, что соединяется с контрольной линией (рис. 4, 5, 6: лунка 2, 8).

• сплошная линия преципитации между лунками с антигеном и испытуемой сывороткой крови инфицированного вирусом лейкоза животного может отсутствовать, однако контрольная линия образует изгиб, направленный в сторону испытываемой сыворотки (рис. 4, 5, 6: лунка 3).

• возможно образование двух линий преципитации, одна из которых соединяется с (контрольной линией), вторая представляет собой прямую линию, расположенную ближе к лунке с испытываемой сывороткой. Образование этой линии свидетельствует о наличии в испытуемой сыворотке антител к антигену р-24 вируса лейкоза (рис. 4, 5, 6: лунка 10).

Реакцию с испытуемыми сыворотками оценивают как отрицательную:

• негативная реакция с испытуемой сывороткой характеризуется отсутствием линий преципитации между лунками с антигеном и испытуемой сывороткой (рис. 4, 5, 6: лунки 1,4,5,7,9,12).

• в том случае, если образована линия между лунками с антигеном и испытуемой сывороткой НЕ соединяется с контрольной линией, а образует "шпору" или пересекает ее, реакцию считают неспецифической и считают как негативную (рис. 4, 5, 6: лунки 6 , 11).

Варианты постановки РИД в чашке Петри.  (см. рис. 4, 5, 6).                            

5.3. Противопоказания:

НЕ исследовать животных младше 4 месяцев.

5.4. побочные эффекты:

отсутствуют

5.5. Особенности предосторожности при использовании:

Каждый компонент вносится отдельной пипеткой. Объем компонентов определяют по уровню заполнения лунок до уровня геля

5.6. Применение во время беременности, лактации:

Не рекомендуем применять за 2 недели до и после отела (в связи с возможностью «выпадения» реакции в РОД - положительных животных)

5.7. Взаимодействие с другими средствами и другие формы взаимодействия:

Не использовать компоненты других наборов

5.8. Дозы и способы введения животным разного возраста:

Для лабораторных исследований