ИФА Столбняк

Общая информация и пояснения к тесту

Благодаря последовательным прививкам малышей, заболеваемость столбняком в развитых странах на сегодняшний день составляет всего 1 случай на 1 миллион жителей.  Для  прививки,  которую  необходимо  повторять  каждые 5-10 лет, используется  столбнячный  анатоксин.  Этот  анатоксин  обладает  такими  же антигенными  свойствами,  как  и  бактериальный  токсин,  но  без  токсического эффекта.  Выработка  защитных  антител  начинается,  как  ответная  реакция иммунной  системы.  Иммунологические  методы  позволяют  определять  эти антитела  в  сыворотке  крови.  Сопоставимость  измерений  достигается  за  счёт корректирования ИФА методов по международным стандартным сывороткам.

Принцип теста

Столбнячный  анатоксин  наносится  на  микролунки  плашки.  Антитела, присутствующие  в  образце  сыворотки  пациента,  связываются  с  антигенами  и выявляются  во  время  второй  инкубации,  при  помощи  меченных  ферментом Античеловеческих  антител  коньюгата).  Фермент  превращает  бесцветный субстрат (H2O2/TMB)  в  конечный  продукт  голубого  цвета.  Ферментная  реакция останавливается  при  добавлении  серной  кислоты,  при  этом  цвет  реакционной смеси меняется из голубого в жёлтый. Окончательное измерение проводится на плашечном фотометре при длине волны  450 нм с референсным ≥ 620 нм.

Поставляемые реагенты

Состав набора (Компонентов набора достаточно для выполнения  96 определений):

- Плашка 96 лунок; Микротитровальная плашка; 12 микролуночных стрипов (разборных) в стрип-холдере; сорбированных антигеном столбнячного анатоксина;

- SeroPP  110 мл; Буфер для образцов, готовый к работе; Фосфатно-буферный раствор NaCl, жёлтого цвета,  содержит 0.01% мертиолята и 0.05% твина 20;

- SeroWP 100 мл; Буфер для промывки, 10х концентрат; трис-буферный раствор NaCl; содержит 0.2% бронидокса- Л и 0.05% твина 20;

- Контроль  IgG + зелёная крышка 2.5 мл; Стандартный контроль IgG, готовый к работе; разбавленная сыворотка человека; зелёного цвета; содержит 0.01% мертиолята и 0.05 % твина 20;

- Контроль  IgG - бесцветная крышка 1.2 мл; Отрицательный контроль IgG, готовый к работе; разбавленная сыворотка человека; содержит 0.01% мертиолята, и 0.05 % твина 20;

- SeroG HD зелёная крышка 12 мл; Коньюгат анти-человеческих  IgG (кроличьих), готов к работе; антитела, коньюгированные пероксидазой в стабилизированном белковом растворе; содержит 10 ppm проклина, 0.01% метилизотиазолинона, 0.01% бромонитродиоксана;

- SeroSC  12 мл; Субстрат; Н2О2/тетраметилбензидин, готовый к работе; 

- SeroStop  12 мл; Стоп-реагент; 0.5 М серная кислота, готовая к работе.