forbot
Укрмедиаснаб, ООО
PREMIUM_STANDARD
+38 (056) 733-95-25
  • Укрмедиаснаб, ООО
  • Каталог товаров
  • Диагностикум гриппозный для РТГА, тип B

Диагностикум гриппозный для РТГА, тип B

Диагностикум гриппозный для РТГА, тип B
  • Диагностикум гриппозный для РТГА, тип B
  • Диагностикум гриппозный для РТГА, тип B
В наличии
1500 UAH
Бренд:ООО "Предприятие по производству диагностических препаратов"
Описание

Диагностикум гриппозный для реакции торможения гемагглютинации (РТГА) сухой представляет собой серотип В вируса гриппа, антигенно актуальный, авидный к антигенам, но резистентный к неспецифическим ингибиторам гемагглютинации сывороток людей выращенный в аллантоисной полости куриных эмбрионов, инактивированный. Титр в реакции гемагглютинации не ниже 1:160. Препарат разлит в ампулы или флаконы по 0,5 или по 1 мл и лиофилизирован, имеет вид аморфной массы белого или светло-желтого цвета.

штамм  В/С-Петербург/40/09 (Викторианская линия)

штамм В/Массачусетс/2/12 (Ямагатская линия)

штамм В/Phuket/3073/13 (Ямагатская линия)

НАЗНАЧЕНИЕ

Диагностика гриппозной инфекции по выявлению прироста антител в сыворотках реконвалесцентов, оценка коллективного иммунитета, оценка иммуногенности гриппозных вакцин, научные исследования.

СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ

  1. Определения титра гемагглютинов

Cухой препарат диагностикума в день постановки РТГА растворяют фосфатно-солевым буферным раствором (ФСБ) pH 7,0 – 7,2 до объема, указанного на этикетке. После этого препарат разводят в микропланшете с помощью ФСБ с коэффициентом 2, начиная с 1:10 до 1:1280 в объеме 50 мкл. Для этого в лунки № 2-12 микропланшета вносят по 50 мкл ФСБ. В первую лунку вносят 100 мкл диагностикума, разведенного 1:10. Для приготовления двукратных разведений переносят по 50 мкл диагностикума из лунки в лунку при тщательном перемешивании, начиная с первой по восьмую лунку включительно, сбрасывая 50 мкл конечного разведения. В каждую лунку добавляют по 50 мкл ФСБ и по 100 мкл 0,5% суспензии куриных эритроцитов (КЭ). Планшеты встряхивают постукиванием рукой о край планшета или поместив в шейкер и оставляют неподвижно на 30-40 мин при комнатной температуре по полного оседания КЭ в контрольных лунках (№ 9-12) планшета. Наибольшее разведение вируса, при котором регистрируется полная агглютинация КЭ, принимается за титр гемагглютинов.

Критерии учета РГА:

+++ полная агглютинация эритроцитов в виде однородной взвеси или пленке на дне лунки

++ частичная гемагглютинация в виде однородной пленки на дне лунки, сочетающаяся с оседание части эритроцитов в вид компактного осадка на дне лунки

незначительная гемагглютинация в сочетании с оседанием эритроцитов в виде компактного осадка на дне лунки

0 отсутствие агглютинации эритроцитов, компактный осадок эритроцитов на дне лунки

НАПРИМЕР: если полная агглютинация эритроцитов наблюдается в разведении 1:320, титр вирусных гемагглютинов (ГА) в составе данного вируссодержащего материала соответствует 1:320.

  1. Приготовление стандартизированного антигена для РТГА.

Единица ГА (ГАЕ) не является мерой измерения абсолютного количества вируса, но является «операционной» единицей, зависящей от методических особенностей титрирования ГА (объемы реагентов, концентрация, вид эритроцитов и т.д.)

ГАЕ определяется как  количество вируса, необходимое для агглютинации равного объема 0,5 % суспензии КЭ.

  1. 1.Определение объема стандартизованного по содержанию ГА антигена (СА), необходимого для постановки РТГА.

НАПРИМЕР: 4 мл СА достаточно для исследования 10 сывороток, каждая из которых разведена в 8 лунках, при условии, что в каждую лунку добавлено по 50 мкл антигена (50 мкл х 10 сывороток х 8 лунок = 4 мл СА).

Для процедуры «повторного титрирования» и с учетом потерь необходимо подготовить дополнительно 4 мл СА.

  1. 2.Определение разведения диагностикума

Стандартизированный антиген (СА) должен содержать 4 ГАЕ в 50 мкл раствора, добавляемого к двукратным разведениям сыворотки. Необходимое разведение диагностикума определяют делением титра гемагглютинов, который был определен в объеме 50 мкл, на 4. Например, при титре ГА 1:320, диагностикум разводят в 80 раз (320:4=80). Для этого 0,1 мл диагностикума добавляют к 7,9 мл ФСБ. В соответствии с количеством исследуемых сывороток необходимо рассчитать и приготовить стандартизированный антиген в необходимом объеме, как указано выше, зарегистрировав использованное соотношение антигена и ФСБ.

  1. 3.Контроль дозы СА повторным титрированием.

Стандартизованный антиген должен содержать 4 ГАЕ/50 мкл. При титрировании СА в объеме 50 мкл с внесением в первую лунку 100 мкл неразведенного СА и приготовлением его двукратных разведений в последующих 5 лунках, полная агглютинация должна регистрироваться в первых 3 лунках планшета. Если СА не содержит 4 ГАЕ/50 мкл, он доводится до нужной дозы добавлением соответствующего количества ФСБ, если титр выше 4, или исходного разведения диагностикума, если титр ниже 4.

НАПРИМЕР: Если полная гемагглютинация наблюдается в 4 лунках (титр 1:8), приготовленный антиген следует развести в 2 раза. Наоборот, в случае, если агглютинация наблюдается только в 2 лунках, в приготовленный антиген необходимо добавить исходное разведение диагностикума в том же количестве, что и при первичном приготовлении раствора.

После тщательного перемешивания контрольное титрирование СА повторяют, доводя его концентрацию до 4 ГАЕ/50 мкл.

  1. Постановка реакции торможения гемагглютинации (РТГА)

Исследуемые сыворотки разводят с помощью ФСБ в соотношении 1:5 и прогревают на водяной бане при 56ºС в течение 30 мин.

Парные сыворотки от каждого больного исследуют в одном опыте. Готовят серию двукратных разведений сывороток на ФСБ (от 1:10 до 1:1280) в объеме 50 мкл. Для этого в 8-лунок каждого ряда вносят по 50 мкл ФСБ. В первую лунку вносят 50 мкл исследуемой сыворотки, разведенной в 5 раз и прогретой при 56º С, и после 3-х кратного перемешивания, переносят 50 мкл разведенной сыворотки в следующую лунку, процедуру повторяют, титруя сыворотку, из последней (8-ой) лунки избыток (50 мкл) разведенной до 1:1280 сыворотки, сбрасывают. К каждому разведению сыворотки добавляет по 50 мкл (4 ГАЕ) стандартизированного гриппозного антигена. Панели встряхивают и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре. После этого в каждую лунку, включая контрольные (по 100 мкл ФСБ), добавляют по 100 мкл 0,5 % КЭ.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Результаты реакции учитывают после оседания эритроцитов в контрольных лунках планшета (через 30-40 мин). Титром сыворотки считают ее наибольшее разведение, при котором наблюдается полная ингибиция агглютинации эритроцитов в результате взаимодействия вируса со специфическими антителами.

Диагностически достоверным считается не менее чем 4-кратное увеличение титров антител в постинфекционной сыворотке по сравнению с сывороткой острой фазы заболевания. При оценке иммуногенности вакцин проводят сравнение титров антител в сыворотках превакцинального периода и через месяц после иммунизации.

ФОРМА ВЫПУСКА

Диагностикумы гриппа выпускают в ампулах/флаконах  по 0,5 или 1 мл. Ампулы/флаконы упаковывают в коробки. Количество ампул/флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают инструкцию по применению и нож ампульный.

СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ.

Срок годности – 2 года. Препарат с истекшим сроком годности применяться не должен.

Диагностикум хранят в соответствии с санитарными правилами при температуре от 2 до 8 ºС.

Транспортирование осуществляется при температуре не выше 8 ºС. Допускается транспортирование при температуре не выше 22 ºС продолжительностью не более 14 суток.

При нарушении условий транспортировки и хранения специфическая активность диагностикумов гриппозных может понизиться.

Характеристики:
Бренд: ООО "Предприятие по производству диагностических препаратов"
Информация актуальна: 01.11.2017

Подробнее

Диагностикум гриппозный для РТГА, тип B от компании Укрмедиаснаб, ООО, Днепр (Украина). Купить Диагностикум гриппозный для РТГА, тип B со склада. Цена, фото, условия доставки. Звоните!